琢磨布景AG真人旗舰厅百家乐
胶质母细胞瘤是最具侵袭性的原发性脑肿瘤，复发性病变的预后极差，且枯竭有用的调整决策。嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR）T细胞因其在难治性淋巴恶性肿瘤调整中的显贵疗效而成为一种有出路的癌症调整时势。但是，由于胶质母细胞瘤等实体肿瘤的异质性以及肿瘤微环境有关的免疫扼制机制，CAR T细胞的期骗一直受到截至。
在之前的一项临床训练中，作家发现外周输注EGFR变异体III的CAR T细胞（CART-EGFRvIII）可在胶质母细胞瘤患者中安全地弘扬靶向效应，但并未不雅察到影像学反馈，且复发肿瘤细胞抒发野生型EGFR卵白，况兼肿瘤内有大都扼制性迂回性T细胞浸润。为了克服这些龙套，作家竖立了一种工程化T细胞居品（CARv3-TEAM-E），它通过第二代CAR靶向EGFRvIII，同期分泌针对野生型EGFR的T细胞接合抗体分子（T-cell–engaging antibody Molecules，TEAM）。野生型EGFR在正常脑组织中不抒发，但在胶质母细胞瘤中险些老是抒发。作家在临床前模子中发现，CAR T细胞分泌的TEAM分子可在CAR T细胞与相应抗原皆集的局部弘扬作用，用于调整异质性肿瘤。作家还发目下体外这些分子有身手将迂回性T细胞从头定向至肿瘤。
基于以上数据，作家启动了首次期骗于东谈主类的1期临床琢磨——脑室内CARv3-TEAM-E T细胞调整胶质母细胞瘤患者的琢磨，以评估CARv3-TEAM-E T细胞在复发性或新会诊的胶质母细胞瘤患者中的安全性。本篇文件发挥了这项琢磨中前3例采选该调整决策患者的预设中期分析遵守。
琢磨时势
琢磨监督与联想：这项非未必、绽开标签、单中心琢磨获取了Dana–Farber/哈佛癌症中神思构审查委员会的批准。作家联想了该琢磨，集结并分析了数据，并决定提交发表。外部数据与安全监测委员会监督了琢磨的开展。作家保证数据的准确性和完好性，并保证琢磨严格礼服公约。
在其他琢磨队伍的入组之前，先入组了一个安全性先导队伍。凭据公约，相宜要求的受试者年岁在18岁及以上，经病理学证实为WHO 4级、复发性、EGFRvIII阳性胶质母细胞瘤。受试者必须有可测量的病变，即在MRI上至少有一个直径至少为10毫米的病灶。既往采选过EGFRvIII靶向调整是排斥圭臬。
调整与分子检测：安全性先导队伍的受试者通过Ommaya囊采选10⁷个CAR阳性的CARv3-TEAM-E T细胞的单次输注。
毒性分析：在悉数这个词琢磨过程中对受试者进行毒性反馈监测。凭据不良事件通用毒性圭臬（第5.0版）对不良事件进行分级。剂量截至性毒性反馈被界说为至少可能与琢磨居品有关且不行归因于疾病进展。
琢磨遵守
安全性先导队伍中的安全性和不良事件： 从2023年3月至7月，3名复发性胶质母细胞瘤患者在麻省总病院入组了INCIPIENT琢磨的安全性先导队伍，其未不雅察到与剂量有关的毒性反馈。被以为至少可能与琢磨居品有关的3级事件包括受试者1出现的捏续3天的3级脑病，以及受试者3出现的捏续8天的3级疲倦。受试者1在琢磨罢手后63天因疾病进展死亡，死因为胃肠谈穿孔，那时受试者正在采选贝伐珠单抗和地塞米松调整。该事件未归因于CARv3-TEAM-E输注。在受试者2和3针对周期性发烧的搜检中，胸部CT发现存顷刻间性肺结节和磨玻璃样暗影。这些发现均为无症状的，并在4至6周后的复查中自行完全消散。在调整后的运转阶段，莫得任何受试者使用糖皮质激素。
受试者1：74岁右利手男性患者，因头痛和矍铄错杂1周就诊，影像学搜检发现左侧岛叶有一增强病灶。开颅手术后，会诊为IDH野生型MGMT甲基化阳性的胶质母细胞瘤。肿瘤呈EGFRvIII阳性且EGFR拷贝数增多。之后患者采选了放疗和替莫唑胺化疗的圭臬调整，在确诊12个月后，MRI指示复发，再次行开颅手术，证实复发性肿瘤为EGFRvIII阳性（见图1A）。随后，受试者1入组了本临床琢磨。
在CARv3-TEAM-E输注的前6天（第-6天）进行的MRI扫描裸露疾病处于行径性进展景况（见图1B）。受试者1在第-1天采选了Ommaya囊脑室造瘘导管植入术。随后在第0天通过该导管装配输注了CARv3-TEAM-E T细胞（10⁷个CAR阳性T细胞）。在单次输注后的第1天进行的MRI扫描裸露肿瘤飞速松开（见图1B）。这种影像学改善在随后的MRI扫描中得到了阐述，但在接下来的2周内是顷刻间的。基于领先的反馈，在第37天（第2周期）采选了第二次10⁷个CAR阳性CARv3-TEAM-E T细胞的输注。
在每个调整周期的多个本事点，使用来自脑脊液和外周血样本的细胞外囊泡RNA进行液体活检。EGFRvIII和EGFR拷贝数在第1周期中升高，随后逐渐镌汰，最终在调整后的脑脊液样本中变得无法检测到（见图1C）。从输注前后的外周血样本中索要的细胞外囊泡RNA也裸露出EGFRvIII和EGFR拷贝数的镌汰（见图1D）。受试者1在第72天因MRI裸露疾病进展而再次采选手术活检。与液体活检遵守一致，调整后肿瘤组织的下一代测序和免疫组化分析也裸露EGFRvIII阴性，而EGFR拷贝数增多。
图1：受试者1的MRI调整反馈和液体活检。图A追念了受试者1的事件本事线。图B裸露了受试者1在切除术后、输注前和输注后的增强MRI。
受试者2：72岁右利手男性患者，因阅读繁重就诊，MRI搜检发现左侧颞叶后部有一强化病灶。开颅肿瘤切除术后，病理分析证实为EGFRvIII阳性、IDH野生型和MGMT甲基化阳性的胶质母细胞瘤。他采选了圭臬放疗和替莫唑胺化疗，以及电场疗法。在首次会诊后的第20个月，影像学搜检裸露疾病进展所在。随后，凭据首次会诊时的EGFRvIII景况入组了本琢磨，并按照修改后的责任经过（见图2）进行调整。该责任经过经过修改，以便在单次手术中同期进行开颅手术、组织取样和Ommaya囊植入。进行再次开颅手术时的分子组织病理学分析裸露复发性胶质母细胞瘤呈EGFRvIII阳性。
受试者2出院后1周再次住院采选输注。他通过脑室内导管采选了10⁷个CAR阳性CARv3-TEAM-E T细胞的单次输注。在输注后的第2天进行的MRI搜检裸露肿瘤的横截面积减少了18.5%，在第69天进一步减少了60.7%（与输注前基线值比较）。这种反馈捏续改善，ag百家乐漏洞并在临了一次评估时（单次输注后杰出150天）仍然捏久，且在此本事未使用糖皮质激素或抗血管生成调整（见图3A）。使用来自脑脊液样本的细胞外囊泡RNA进行的纵向液体活检裸露，跟着本事的推移，EGFRvIII和EGFR拷贝数逐渐镌汰，并在调整后的样本中保捏在检测阈值以下（见图3B）。
图2：受试者2和3使用的责任经过。该经过允许在单次手术中同期进行开颅手术、组织取样和Ommaya囊植入。
受试者3：57岁右利手女性患者，因数周的找词繁重和癫痫发作就诊，MRI搜检发现左侧顶叶有一处对比增强病灶。她采选了开颅手术和肿瘤切除术，病理分析证实为IDH野生型和MGMT未甲基化的胶质母细胞瘤。肿瘤呈EGFRvIII抒发阳性且EGFR拷贝数增多。她采选了放疗和替莫唑胺化疗，但由于出现血小板减少症，化疗剂量有所减少。在确诊后的第6个月，隔绝影像学搜检裸露疾病复发的迹象。
受试者3入组了本琢磨（见图2）。她采选了再次开颅手术，进行绽开式活检并植入Ommaya囊。手术时的组织分析裸露EGFRvIII抒发丢失，但通过荧光原位杂交证实存执政生型EGFR扩增的细胞核，也检测到了EGFR转录本。在输注前进行的MRI搜检再次裸露正常的复发性疾病职守（见图3C）。受试者3出院后2周再次住院采选输注。她通过脑室内导管采选了10⁷个CAR阳性CARv3-TEAM-E T细胞的单次输注。在单次输注后的第5天进行的MRI扫描裸露肿瘤险些完全松开（见图3C）；但是，在输注后1个月内出现了复发迹象。从调整后的脑脊液样本中索要的细胞外囊泡RNA裸露，在孤速即间点检测到低拷贝数的EGFRvIII和EGFR，随后变得无法检测到。
图3：受试者2和3的MRI调整反馈和液体活检。图A裸露了受试者2在输注前后的增强MRI；在输注后第2天不雅察到肿瘤松开。并在后续本事点保捏松开。图B裸露了从脑脊液中索要的细胞外囊泡RNA中检测到的EGFRvIII和EGFR拷贝数随本事的变化。图C裸露了受试者3在单次输注CARv3-TEAM-E T细胞前后的增强MRI。
有关数据：悉数三名受试者在输注后第2天均出现了发烧岑岭（见图4A）。系统性炎症记号物水平在输注后的第2周和第3周飞腾，并在第30天规复到基线水平。
对脑脊液样本进行的细胞病理学分析裸露，在输注后立即出现总核细胞计数升高，随后在第1周呈指数级下落，然后逐渐镌汰。脑脊液样本的细胞分类领先以中性粒细胞为主，然后在输注后的30天内滚动为以淋巴细胞为主。定量分析（见图4B）裸露，在输注后获取的脑脊液样本中，CAR阳性和TEAM阳性T细胞暂时存在，但在第4周时下落（见图4C），这与归拢时间脑脊液隔室中炎症细胞因子环境的正常化相对应（见图4D）。在输注后2至3周，外周血中检测到CARv3-TEAM-E细胞，但其存在是顷刻间的（见图4E）。
悉数三名受试者在外周血中的CAR T细胞完全计数均在第21天达到峰值。在那时，血液中CAR阳性T细胞名义皆集TEAM的百分比在受试者1中为2.00%，在受试者2中为0.64%，在受试者3中为0.00%。相悖，脑脊液样本中CAR阳性T细胞名义皆集TEAM的百分比在受试者1中为70.3%，在受试者2中为17.6%，在受试者3中为56.2%。这些数据进一步补助CARv3-TEAM-E平台可能有助于安全地在核心神经系统局部靶向野生型EGFR。
图4 三名受试者的有关数据。A裸露了悉数三名受试者随本事的体温弧线。B裸露了受试者1的CARv3-TEAM-E的代表性流式细胞术分析。C裸露了悉数三名受试者中的CAR阳性和TEAM阳性T细胞定量分析的遵守。D裸露了在输注后第一个月受试者脑脊液样本中炎症细胞因子的变化。E裸露了外周血样本中CAR阳性和TEAM阳性T细胞。
盘考
琢磨者发挥了一项早期1期、首次期骗于东谈主类的琢磨遵守，即通过脑室内输注CARv3-TEAM-E T细胞调整复发性胶质母细胞瘤患者。在本琢磨中，作家在多名患者中不雅察到在采选单次脑室内输注双重靶向的CARv3-TEAM-E T细胞后数天内出现了显贵的影像学反馈。这些反馈在三名患者中的两名是顷刻间的，而又名患者在短期随访本事出现了捏久的肿瘤松开。
尽管CAR T细胞在调整血液系统恶性肿瘤方面取得特出胜，但其在实体瘤患者中的期骗尚未得到证实。用于胶质母细胞瘤患者的CAR T细胞和双特异性抗体仅靶向单一抗原，因此受到肿瘤异质性、抗原丢失的出现以及免疫逃遁的截至。本琢磨的CARv3-TEAM-E T细胞提供了道走漏释，即不错同期使用CAR T细胞靶向多个名义抗原，并证实EGFR是胶质母细胞瘤中一个合适的免疫调整靶点。此外，尽管全身组织正常抒发其靶点，但CAR T细胞分泌的T细胞接合抗体是安全的。
本琢磨标明，即使在患有晚期、脑骨子内疾病的胶质母细胞瘤患者中，也不错飞速获取CAR介导的抗肿瘤反馈。这一发现与之前的一项发挥变成对比，在该发挥中，又名患有复发性软脑膜疾病的患者在采选16次颅内输注单特异性白介素-13受体α2 CAR T细胞调整后出现了完全缓解。
值得细巧的是，即使在枯竭EGFRvIII抒发的情况下（在受试者3中），CARv3-TEAM-E T细胞也裸露出抗肿瘤活性。诚然，对这些数据的解释仍受到组织取样在异质性疾病中的局限性、用于测量EGFRvIII抒发的检测时势的智谋度以及EGFRvIII抒发的顷刻间性的影响，这些肿瘤在当然病程中会发生变化。
尽管在该组病例中不雅察到了显贵的反馈，但作家不雅察到三名患者中的两名最终出现了肿瘤进展，这与输注后数周内CARv3-TEAM-E T细胞有限的捏久性相对应。因此，这些数据需要在将来的琢磨中对CARv3-TEAM-E T细胞进行评估，同期皆集专诚联想以增强捏久性的计策，可能通过化疗预科罚或零散的策画输注来达成。
总之，该琢磨发挥了CARv3-TEAM-E T细胞调整复发性胶质母细胞瘤的早期1期琢磨遵守，裸露了短期内显贵的影像学反馈。
参考文件：Bryan D, Choi., Elizabeth R, Gerstner., Matthew J, Frigault., Mark B, Leick., Christopher W, Mount., Leonora, Balaj., Sarah, Nikiforow., Bob S, Carter., William T, Curry., Kathleen, Gallagher.AG真人旗舰厅百家乐, Marcela V, Maus.(2024). Intraventricular CARv3-TEAM-E T Cells in Recurrent Glioblastoma. N Engl J Med, 390(14), 0. doi:10.1056/NEJMoa2314390