一、技能空洞
端粒是位于染色体结尾的保护性结构，其长度与细胞病弱、疾病发生及个体寿命密切关系。本推行接收SYBR Green染料法团强健时荧光定量PCR（qPCR）技能，通过特异性引物扩增端粒序列与单拷贝基因，已矣端粒长度的相对定量分析。该纪律奢睿度高、重叠性好，可精准反应样本端粒动态变化。
二、推行主义
通过索要样本基因组DNA，欺诈qPCR技能扩增端粒重叠序列与单拷贝基因，打算端粒相对长度（T/S比值），为病弱磋议、疾病机制探索及生物符号物成就提供要道数据复旧。
三、推行经由
1、DNA抽提
取约200ul血液样品至1.5mL离心管中，严格按照“TIANamp Genomic DNA Kit”评释书姿首进行索要，详见评释书附件。
终末洗脱的姿首时，加入了50uL洗脱缓冲液TE进行洗脱。
2、定量PCR检测
1）将Mix在4℃下融解，AG百家乐上头讲理地荆棘倒置混匀并进行少顷离心。
2）冰上配制下表中的反应液
因素 加入量 终浓度
HieffTM qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox) 5μL 1×
Forward Primer (10μM) 0.2μL 0.2 μM
Reverse Primer (10μM) 0.2μL 0.2 μM
DNA 2uL
RNase Free dH2O 补足至10 uL
3）将反应管进行少顷离心，确保通盘反应液在反应孔底部。
4）接收三步法范例进行反应：
轮回数 姿首 温度 时间 荧光集结
1 预变性 95℃ 5min No
40 变性 95℃ 10s No
退火 60℃ 30s Yes
上述反应为止后，从60℃～95℃过程中进行溶化弧线分析
四、技能上风
高特异性：溶化弧线分析确保扩增居品特异性，幸免假阳性
高通量：复旧各样本并行检测，大概推行时间
数据可靠：接收内参基因革新，确保恶果准确性
应用等闲：适用于血液、组织、细胞等多种样本类型
五、适用规模
1️⃣病弱机制磋议与抗病弱药物评价
2️⃣ 癌症、心血管疾病等与端粒裁汰关系的病理磋议
3️⃣ 干细胞功能评估与再生医学应用
4️⃣环境毒理与发射明白对端粒影响的监测
5️⃣ 整合基因组学数据，构建端粒动态变化模子
六、代表性推行恶果
七、客户提供
1 细胞样品: ＞2×106；细胞培养上清≥1ml
动植物组织/细菌、真菌样品: ＞100mg（黄豆粒大小）；
血清、血浆、全血过火他体液样品: ＞200μl；
RNA/DNA/cDNA: v≥10μl，c≥50ng/μl
2 物种信息及基因信息
（注：组织样品需液氮速冻、保存于-80度网络彩票和AG百家乐，样品使用干冰寄送，幸免浑浊和反复冻融）